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SYBR Green 荧光定量PCR Mix 试用活动火热进行中

发布时间2015-03-17 22:57发布人: 博凌科为浏览次数:

2 x SYBR Green qPCR Mix
SYBR Green 荧光定量PCR Mix
 


产品组成、储存、浓度:

组成 153301 153302
2 x SYBR qPCR Mix 1.25 ml 1.25 ml x 4



储存:- 20 避光保存至少 6 个月,使用前充分融解混匀。短期使用可放在 4 ,避免反复冻融。

制品说明:
本制品本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。已经将热启动HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTP、特殊稳定剂、优化的反应缓冲液、BSA和SYBR® Green I等试剂预混成一种适合Real Time PCR反应检测用2×Premix Type试剂,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。使用时只需加入模板和引物和水,便可在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对目的基因进行准确 定量检测,重复性好,可信度高。本品采用全新的Hotmaster Taq DNA 聚合酶,该酶不同于一般Hot-start 酶之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而Hotmaster Taq DNA 聚合酶是利用抑制剂通过温度调节方式封闭Hotmaster Taq DNA聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物 形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。

注意事项:
1. 本制品不含内参染料ROX,客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX内参染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差,配套ROX产品货号为1538 Rox Reference Dye。
2. 本制品含SYBR® Green I 强光下易分解,降低敏感度,使用时避免长时间强光照射本制品。
3. 建议在冰上配制PCR反应液,再放入PCR仪器中扩增。可以提高扩增特异性,减少背景。
4. 本制品含有4 mM MgCl2(反应体系终浓度是2 mM Mg2+),可用25mM MgCl2 优化Mg2+浓度。


建议 PCR 条件(以20μl 、50 μl反应体系为例,反应液配制请在冰上进行)
Components Volume Volume Final Concentration
2 x Sybr Green qPCR Mix 10μl 25μl
DNA Template 0.8 μl 2 μl as required
Forward Primer (10 μM) 0.4 μl 1 μl 0.2 μM each
Reverse Primer (10 μM) 0.4 μl 1 μl 0.2 μM each
ddH2O 8.4μl 21μl Not applicable
Final volume 20 μl 50 μl  
 
PCR 循环(三步法)
94℃ 2-3 min                                                            
94℃10-20 sec
55-60℃ 10-20 sec   40 cycles
72℃ 20-30 sec
Dissociation Stage