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HiFi Ex植物RNA提取试剂盒
目录号:1138

1138-HiFi Ex 植物RNA快速提取试剂盒
目录编号 包装单位
113801 20
113802 50

适用范围:
适用于快速提取植物组织细胞总RNA,使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留,RNA可用于反转录PCR,荧光定量PCR等。

产品介绍:
本公司独家推出HiFi 无苯酚、氯仿RNA快速提取技术基础上,又独家研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,然后RNA被选择性洗脱滤过,吸附在基因组DNA清除柱上的残留DNA无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后, RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点:
1.完全不使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,世界上最简单快捷的试剂盒。
3.独有的植物RNA助提剂PlantAid可以有效结合多糖多酚, 提高清除效果。
4.独家研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留, 得到的RNA不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
5.适应性极其广泛,可以提取包括棉花、松针、冬青树叶、葡萄叶片等100多种国内外试剂盒提取失败的样品。详细样品列表请参考公司主页产品介绍。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。

HiFi Ex植物RNA提取试剂盒不使用苯酚,氯仿有毒性物质,采用离心柱型操作,添加有自主创新的多糖多酚去除成分,是多糖多酚样品的特效产品,20分钟内得到高质量RNA。成功提取海棠叶片、黑加仑。
部分成功样品:

植物:虎杖、大豆、草莓、胡杨、油桐果、梨子皮、板栗花序、冬青、月季花雌蕊、蔷薇、旱柳、桉树、琵琶花果、丹参、沙棘、冬枣、芦荟、仙人掌、报春花、水稻、玉米、唐菖蒲、樱桃、白玉兰、毛白杨、樱花、葡萄、棉花、海棠、黑加仑、烟草、梨树叶、五倍子、泡桐、西瓜、芍药、雪莲、拟南芥、百合花、百合叶子雌蕊雄蕊、叶子种子、番木瓜、甘薯、紫薯、油松、紫菜、绿藻、香蕉、水仙花、青花菜、地被菊、苹果、梅花、番茄、石斛、山杏人参、西洋参、栀子、洋葱、红豆杉、毛桃、苎麻、慈姑、葛根、甘肃桃、玫瑰花、槟榔果、甜糖菊、硅藻、牡丹、胡杨、油桐果、梨子皮、板栗花序、青皮云杉、红树根、铁线蕨、黄瓜、小麦油茶、马尾松、芜菁、毛果杨、木薯、大叶落地生根等等,

真菌:桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)、菇类等。

多糖多酚植物RNA提取试剂盒失败原因和解决方案

很多植物RNA的样品由于含有大量的多糖、多酚、代谢产物、色素等成分,造成RNA提取过程中氧化、褐化、降解、由于植物品种的多样性造成情况更加复杂。由于手工的CTAB类的方法提取时间太长,太繁琐,不在讨论之列。一直以来没有一款好的植物RNA提取试剂盒满足科研工作者的要求。

下面我们来分析一下植物RNA为什么不能提取成功的原因:
  市面上最常见的RNA提取试剂盒无非两种:第一种:直接裂解过柱的方法(离心柱) 第二种:TRIzol改良类方法(包括溶液型的和离心柱型的)
  第一种试剂盒失败的原因:直接裂解过柱的方法是目前最先进的方法,但是也是技术含量最高的方法。这个方法采用裂解液(不含苯酚,氯仿)直接裂解,RNA/DNA同时过柱,然后在柱子上面直接分离RNA/DNA,所以,这种方法的优点第一在于,避免了多糖多酚植物使用trizol不能成功分离RNA/DNA的弊端、第二在于,不使用有毒的苯酚氯仿。但是正是因为其技术先进,所以难度很高,国内厂家包括进口公司有两个技术难点一直没有突破。第一,裂解液的成分必须添加去除多糖多酚,代谢产物的成分。否则会同样碰到多糖多酚干扰提取。第二和trizol原理不同,直接过柱法DNA/RNA同时吸附在柱上。如何去除DNA是另一个难点。会残留大量DNA
  第二种试剂盒失败的原因1市面上面最流行就是用Trizol提取RNA或者Triol改良或者Trizol加离心柱的改良方法。trizol也就是异硫氰酸胍/苯酚/氯仿最适合提取动物源性的组织细胞RNA,针对多糖多酚含量低的植物材料,TRIzol类产品也可以提取。但是多糖、多酚、次级代谢产物丰富的情况下,trizol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰,要么残留大量DNA,要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物,氧化破坏RNA,或者残留这些多糖多酚,色素代谢产物等抑制下游反转录实验。限于技术水平的限制,市面上绝大多数的国产厂家是使用trizol的方法进行改良,但是实践证明,无论是不是加了离心柱。改良不能从根本上解决问题。判断试剂盒是否使用这种改良的方法非常简单:裂解液是否含有苯酚的味道和使用氯仿,如果使用到了氯仿就是TRIzol方法的改良。

针对多糖多酚植物的特点结合这两种试剂盒失败的原因,开发出了HiFi植物RNA快速提取试剂盒,第一采用直接过柱子方法,彻底抛弃了TRIZOL苯酚,氯仿,使用无毒原料,并且添加了有自主知识产权的去除多糖多酚成分解决了多糖多酚和代谢产物对于RNA的破坏和干扰分离。第二突破了直接过柱子DNA去除的技术难点,解决了DNA残留过多问题。使用我们开发的试剂盒,20分钟提取步骤非常简单,非常快速,无毒无苯酚氯仿。提取的RNA可以成功完成下游反应试验。